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導(dǎo)航
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一、細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)知識培訓(xùn)
1、細(xì)胞培養(yǎng)概述
2、細(xì)胞培養(yǎng)所需設(shè)備與培養(yǎng)用液
3、培養(yǎng)細(xì)胞的生物學(xué)特征
4、原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)、凍存與復(fù)蘇
5、細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方法
詳情請下載 細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)知識培訓(xùn)
二、細(xì)胞凋亡與增殖檢測知識培訓(xùn)
01 細(xì)胞增殖與活力檢測
膜損傷檢測
代謝活性檢測
DNA合成檢測
熒光標(biāo)記檢測
目錄 ATP水平測定
02 細(xì)胞凋亡與增殖檢測
磷酯酰絲氨酸外翻檢測
線粒體膜電位檢測
DNA片段化檢測
Caspase活性檢測
熒光標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)檢測
詳情請下載 細(xì)胞凋亡與增殖檢測知識培訓(xùn)
三、熒光素酶報告基因基礎(chǔ)知識培訓(xùn)
報告基因系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于真核生物基因表達(dá)和細(xì)胞生理學(xué)研究，包括受體活性、轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、mRNA加工和蛋白質(zhì)折疊等?！半p報告基因”通常被用來提高實驗精確度，即在一個系統(tǒng)中同時表達(dá)和測量兩個獨立的報告基因。一般來說，實驗組報告基因與具體實驗條件的影響是相關(guān)的，而共同轉(zhuǎn)染的內(nèi)對照組報告基因則是用來充當(dāng)校正參數(shù)，作為內(nèi)參提供反應(yīng)基線。將實驗組的結(jié)果與內(nèi)對照組的結(jié)果進(jìn)行約化處理，可降低由細(xì)胞存活率或轉(zhuǎn)染效率的差異而導(dǎo)致的結(jié)果波動，同時還可消除由取樣體積、細(xì)胞裂解效率和儀器測定引起的實驗誤差。因此，雙報告基因檢測可以通過減少外部影響來獲得更可靠的實驗數(shù)據(jù)。應(yīng)用于啟動子活性檢測、miRNA靶基因驗證 (針對3’UTR元件)，本文就報告基因種類，特點，檢測原理等進(jìn)行介紹。
詳情參見雙酶報告基因基礎(chǔ)知識培訓(xùn)
四、細(xì)胞蛋白熒光標(biāo)記知識培訓(xùn)
許多類型的熒光試劑相繼被開發(fā)用于細(xì)胞染色，化學(xué)標(biāo)記蛋白質(zhì)、核酸和其他生物分子。當(dāng)特定抗體或純化的生物分子被熒光染料化學(xué)標(biāo)記后，它們就成為檢測靶抗原的熒光探針，可被應(yīng)用于細(xì)胞成像、高通量分析、流式細(xì)胞術(shù)、western blotting和ELISA等。Meilunbio?可為您提供廣泛的熒光試劑產(chǎn)品包括細(xì)胞標(biāo)記，蛋白標(biāo)記，其他熒光染料等。本文就如何進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記、蛋白標(biāo)記，從其原理及操作進(jìn)行了介紹，并闡述了常見問題的應(yīng)對措施。
詳情參見細(xì)胞蛋白熒光標(biāo)記知識培訓(xùn)
五、蛋白提取基定量礎(chǔ)知識
蛋白質(zhì)參與生物體內(nèi)幾乎所有的生命活動，對蛋白質(zhì)的研究有助于揭示生命活動現(xiàn)象和分子生物學(xué)機理，蛋白質(zhì)的提取是研究蛋白質(zhì)的第一步，通常是提取特定組織細(xì)胞中的總蛋白，或是處于細(xì)胞特定位置的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)提取實驗的成敗，直接影響后續(xù)的蛋白質(zhì)檢測和提純等實驗操作。 蛋白質(zhì)的精確定量是蛋白質(zhì)相關(guān)實驗所必需的，蛋白質(zhì)定量可以分為總蛋白定量和單種蛋白定量，總蛋白定量分析有多種不同方法，包括紫外吸光值檢測法、Lowry檢測法、BCA檢測法和Bradford檢測法等。單種蛋白定量主要包括酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）,Western blot和質(zhì)譜分析等。詳情請參考蛋白提取定量新手上路。
六、蛋白電泳及免疫印跡基礎(chǔ)知識培訓(xùn)
電泳是帶電顆粒在電場作用下向著與其本身所帶電荷相反的電極移動的現(xiàn)象，而聚丙烯酰胺凝膠蛋白電泳是帶有電荷的蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠的介質(zhì)中向其所帶電荷相反的電極移動，又因為聚丙烯酰胺凝膠孔徑的關(guān)系，使不同分子量的蛋白質(zhì)分離開。按照制備凝膠的支持物形狀和電場方向可分成多種不同的電泳技術(shù)，本文主要講述使用最廣泛的垂直平板凝膠電泳，這種電泳的優(yōu)點是可以在同一條件下，在同一凝膠中對多種樣品進(jìn)行電泳。
蛋白免疫印跡，也稱為Western blotting，是從多種復(fù)雜蛋白質(zhì)中檢測目的蛋白質(zhì)的一種方法，這種技術(shù)誕生于20世紀(jì)70年代，由Towbin等人發(fā)明了該項技術(shù)，現(xiàn)在已經(jīng)成為蛋白質(zhì)分析的常規(guī)技術(shù)。該實驗流程是將處理好的蛋白樣品依據(jù)蛋白質(zhì)的分子量、電荷數(shù)和等電點等性質(zhì)對其進(jìn)行電泳分離，然后轉(zhuǎn)移到固相載體上，再利用抗體和抗原之間的特異性結(jié)合的原理，通過抗體（一抗）識別所要研究的蛋白質(zhì)，然后用能夠與一抗特異性結(jié)合的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般會偶聯(lián)能夠檢測的酶，通過對酶濃度的檢測，從而對目的蛋白質(zhì)進(jìn)行定性或半定量實驗。綜上所述，免疫印跡可以分為兩個步驟：一是蛋白質(zhì)由凝膠轉(zhuǎn)移至固相載體；二是對目的蛋白的特異性檢測。
請參考蛋白電泳免疫印跡基礎(chǔ)知識培訓(xùn)。
七：實驗動物模型基礎(chǔ)知識
實驗動物模型制作原則
實驗動物用藥量的計算
實驗動物給藥方法
常見疾病模型造模方法
請參考實驗動物模型基礎(chǔ)知識
八：信號通路研究方法策略基礎(chǔ)知識
信號蛋白表達(dá)水平分析
信號蛋白在細(xì)胞內(nèi)定位
關(guān)鍵信號分子抑制或增強
請參考信號通路研究方法策略基礎(chǔ)知識
